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液相色譜對于實驗室分析員來說是容易上手的儀器了，但就算是經(jīng)驗豐富的分析員都會經(jīng)常出現(xiàn)錯誤的操作導致液相色譜儀器發(fā)生故障。而這個時候分析員一般就會選擇把色譜柱進行反沖這個方法，但恒譜生在這里建議分析員在一般情況下還是不要反沖色譜柱，除非色譜柱有特別說明是可以反沖的。那么，哪些柱子不能反向沖洗呢？其實有兩種，一種是兩端柱篩板不一樣是不適合的，因為入口的那一端柱篩板的孔徑比較大會導致固體顆粒物質(zhì)的堵塞，所以一旦進行反沖就有可能出現(xiàn)造成填料的流失從而導致分析柱的柱效下降的情況；另一種...

在高效液相分析檢測樣品的過程中，液相保護柱會受到來自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染，從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指，HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒，以及流動相系統(tǒng)過濾不全部殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指，未全部溶解的樣品或者已全部溶解的樣品進入色譜系統(tǒng)中，由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異，導致沉淀析出污染系統(tǒng)。特別是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測，因基質(zhì)的復雜性，色譜柱受污染的情況會更加嚴重。污染會導...

在正相色譜中，一般采用極性鍵合固定相，硅膠表面鍵合的是極性的有機基團，鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑，如烴類溶劑，或其中加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等)，以調(diào)節(jié)流動相的洗脫強度。通常用于分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬于分配色譜。組分的分配比K值，隨其極性的增加而增大，但隨流動相中極性調(diào)節(jié)劑的極性增大(或濃度增大)而降低。同時，極性鍵...

溶劑混合時氣泡的形成會導致液相色譜分析中的許多問題，這些問題可以通過對流動相進行脫氣來避免。當溶劑混合時，空氣的溶解度低于同比例的純?nèi)軇?，過量的空氣會從溶液中析出/冒泡。脫氣是用來描述溶解氣體從溶液中出來的術語。這種現(xiàn)象也可能發(fā)生在HPLC系統(tǒng)中，其中粗糙的表面會產(chǎn)生氣泡形成的成核位點。由于產(chǎn)生死體積，氣泡還可以改變流動相通過色譜柱的流量。在HPLC分析中，通過對流動相脫氣，可以在很大程度上避免因氣泡形成而產(chǎn)生的問題。一、HPLC系統(tǒng)中的除氣1.低壓混合：低壓混合系統(tǒng)更容易形...

在日常分離分析工作中，高效液相色譜柱的使用和維護十分重要，色譜柱使用是否得當，直接影響色譜柱的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。高效液相色譜柱的正確使用：（1）柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動，以免柱床產(chǎn)生空隙。（2）如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱子的壽命。（3）避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動...

高效液相色譜系統(tǒng)(HPLC)是指分析化學中的一種技術,用于識別、分離和量化混合物中的每種成分。C8和C18均指色譜柱鍵合面的烷基鏈，都用于高效液相色譜系統(tǒng)。一、什么是C18：C18柱、C8柱和C4柱都是直鏈烷基硅烷相。C18是辛基癸基硅烷，含有18個與二氧化硅結(jié)合的碳。因此C18比C8（8個碳）或C4（4個碳）具有更多的碳和更長的碳鏈。由于額外的碳，C18具有更大的表面積，流動相必須穿過。這在鍵合相和洗脫物之間提供了更多的相互作用時間。因此，樣品洗脫得更慢，分離度更高。C18...