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高效液相色譜法在臨床實驗室中對不同體液中生物標志物的分離和定量起了重要作用。HPLC與其他常規(guī)檢測器(例如UV,熒光和電化學檢測器)相比,更趨向于質(zhì)量敏感檢測。填充材料技術的進步,例如亞微米表面多孔二氧化硅顆粒已經(jīng)被引入了超高壓液相色譜中,在不遇到高背壓的情況下提高了分離效率。
高效液相色譜儀的系統(tǒng)壓力較高,色譜柱是產(chǎn)生系統(tǒng)壓力的主要部件,高背壓會影響很多方面比如反壓太高超過流通池的耐受壓力,會導致流通池的損壞。恒譜生液相色譜柱均一的粒徑保證了流動相穩(wěn)定的流動,并且確保色譜柱有著較低的柱壓。
恒譜生分析保護柱也具有低背壓,不漏液,死體積少等優(yōu)點,能夠減少液相色譜系統(tǒng)內(nèi)的部分壓力。
除此之外,其他先進技術的引用與結(jié)合,在不同程度上優(yōu)化了液相色譜分析工作方法,例如高效的自動進樣器,減少檢測器的細胞體積以及數(shù)據(jù)收集和分析的改進等等。很多實驗室每天需要生成數(shù)百個樣本的多個參數(shù)的報告,這些方法都能節(jié)約工作時間與提升工作效率。
臨床實驗室通常處理數(shù)百種生物流體樣本,例如血液,尿液和其他體液。需要有效的提取過程與快速分析相結(jié)合,才能快速處理如此繁重的工作,但又不影響分析的質(zhì)量,患者的治療方法與報告的準確性有很大關系,因此快又準的報告是重中之重。
本文簡要討論了臨床實驗室中一些常見的HPLC分析應用。
生物樣品需要事先處理和加工,以消除來自其他成分的干擾,尤其是在血液等液體的情況下。采用溶劑萃取,超濾和固相萃取等方式可防止對檢測產(chǎn)生干擾并且可防止色譜柱內(nèi)部堵塞。預防色譜柱堵塞還可以借助一些液相分析耗材配件的幫助,比如在色譜柱前添加預柱(保護柱)起到過濾顆粒物,化學物,雜質(zhì)等作用。這些污染物會污染色譜柱、堵塞色譜柱,恒譜生建議在色譜柱前安裝分析保護柱可以起保護色譜柱、防止堵塞、延長色譜柱的壽命等作用。
除了安裝保護柱,還可以安裝在線過濾器來防止色譜柱堵塞,恒譜生在線過濾器由潔凈的高品質(zhì)不銹鋼部件組成,這些過濾器旨在減少色譜柱入口篩板的污染和堵塞問題。
兒茶酚胺
兒茶酚胺是一種含有兒茶酚和胺基的神經(jīng)類物質(zhì)。兒茶酚胺充當神經(jīng)遞質(zhì)和腎上腺激素。去甲腎上腺素,腎上腺素和多巴胺是可用于診斷是否患有帕金森氏病,高血壓和肌營養(yǎng)不良。以前依靠使用電化學或熒光檢測法檢測尿液或血漿樣品中的兒茶酚胺含量,而使用HPLC檢測是一種便捷的新分析方法。
維他命
維他命在人體生長、代謝、發(fā)育過程中發(fā)揮著重要的作用。維他命在體內(nèi)是微量的,在除去存在于體液(例如血液和腦脊髓液)中的干擾化合物后,HPLC提供了靈敏且可靠的維他命估算技術。雖然這樣分析技術的成本十分高昂,但是由于具有超高靈敏度和快速處理繁重工作量的優(yōu)勢,一些大型臨床實驗室還是會采用這種技術。
糖尿病監(jiān)測
糖尿病是以高血糖為特征的代謝性疾病。高血糖則是由于胰島素分泌缺陷或其生物作用受損,或兩者兼有引起。HPLC能準確定量地評估糖化血紅蛋白被證明是有效控制血糖的監(jiān)測技術。即使在收集樣本兩周后,也可以通過HPLC分析血紅蛋白HbA1c在專用紙上收集并干燥的血斑。該方法為患者長期血糖控制提供了高靈敏度的檢測。