高效液相色譜柱是高效液相色譜的心臟，在高效液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性，延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱使用時間后就會出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化，如不采取措施，將會縮短色譜柱的使用壽命，影響工作效率，并造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。因此，有必要加強(qiáng)和規(guī)范色譜柱的管理，從而延長色譜柱的使用壽命。本文從影響色譜柱使用壽命的幾個因素出發(fā)，從管理的角度，探討色譜柱的維護(hù)與保養(yǎng)。

　　影響高效液相色譜柱使用壽命的因素

　　1.流動相

　　在以水溶液為流動相時，水溶液中的微生物例如細(xì)菌容易生長，當(dāng)用水溶液或有機(jī)酸緩沖液保護(hù)柱子時，一些霉菌可能在色譜柱中滋生，堵塞固定相顆粒間的空隙。由于濕法填充技術(shù)的問世，目前普遍使用的色譜柱填料直徑一般都小于10um，流動相中的顆粒雜質(zhì)很容易先沉積在柱頭然后慢慢堵塞柱子。流動相的pH值對色譜柱也有影響，特別是對化學(xué)鍵合硅膠填料，水溶液的pH最適范圍在2~7.5之間，當(dāng)pH>8時，硅膠會釋出生成絮狀物堵塞柱子，且難以復(fù)原，柱效很快降低，甚至*失效。當(dāng)在緩沖液中加入有機(jī)溶劑例如甲醇或乙腈時，鹽類的溶解度下降，會析出鹽沉淀，堵塞柱子。同時流動相中的有機(jī)溶劑和鹽會腐蝕色譜柱頭的篩板，產(chǎn)生柱頭凹陷。流動相的極性對柱子也有一定影響，對于硅膠柱，甲醇、水、冰乙酸等極性較大物質(zhì)會破壞填料，反之，對于化學(xué)鍵合硅膠，極性小的物質(zhì)如正丁醇、二氯甲烷等也起同樣的作用。堿性溶液會破壞陽離子交換樹脂色譜柱，而酸性溶液容易損壞陰離子交換樹脂柱。

　　2.樣品和固定相

　　如果有少量或微量的樣品不能夠溶解在流動相中，在通過固定相會堵塞柱子。樣品中的顆粒雜質(zhì)也會堵塞柱子。樣品組分例如糖、蛋白質(zhì)等通過柱子時會產(chǎn)生不可逆吸附，這樣固定相的活性點被覆蓋。樣品組分還會與固定相產(chǎn)生反應(yīng)，尤其是對于氨基柱的影響較為嚴(yán)重，因為氨基易與酐、酮形成希夫(Schiff)縮合而減少活性點，使保留時間縮短。高效液相色譜柱鍵合相基團(tuán)脫落、固定相分解和活性基團(tuán)變性以及會影響柱效和保留時間的顯著改變。大多數(shù)鍵合相都是通過硅氧硅鍵(Si-O-Si)連接在硅基質(zhì)上，形成帶有有機(jī)基團(tuán)的固定相Si-O-Si-R(R為CnH2n+1)，硅氧硅鍵可能在水溶液中水解而斷裂，使鍵合基團(tuán)脫落。